药智论坛

查看: 2362|回复: 0

[药代动力学] 汉黄芩素三大提取方法步骤详解 汉黄芩素是什么

[复制链接]
发表于 2021-2-1 16:32:14 | 显示全部楼层 |阅读模式
  汉黄芩素有抗癌、抑菌、利尿、解痉、清热、止痛等作用。汉黄芩素为黄芩提取物,黄芩为常用中药,有清热泻火、解毒、止血、安胎等作用,其有效成分为黄酮类。目前从黄芩中提取并鉴定出结构的黄酮类成分已有十几种,主要包括黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素等(汉黄芩素生产厂家)。
  方法一:
  取黄芩药材,粉碎过10目筛,加水浸泡4小时,滤过,药渣加入15倍量的乙醇70℃提取2次,每次2小时,,滤过,合并滤液,减压浓缩成相对密度1.05~1.15(40℃测)的浓缩液,将浓缩液置入大孔吸附树脂分离柱中,采用湿法装柱,用蒸馏水洗涤树脂柱至水洗液呈无色,水洗液弃去,用95%乙醇以进行洗脱,收集第二条黄色带的洗脱液,减压浓缩至相对密度1.05~1.15(40℃测)地浓缩液。然后采用高速逆流色谱分离浓缩液,在室温下分别将系统1(正己烷-丙酮-乙醇-水=6∶4∶4∶9),系统2(正己烷-正丁醇-乙醇-水=2∶6∶5∶5)置于两个分液漏斗中振摇,放置,分别取上、下相,将上相作为固定相,下相作为流动相,将固定相泵入色谱柱中,使柱中充满固定相后,再让仪器以800r/min转动,同时将流动相以2.0ml/min的流速泵入。待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到动态平衡后,将样品溶液注入色谱系统中,同时在出液端接紫外检测器。在274nm波长处对流出液连续检测,与汉黄芩素标准图谱对应,收集液蒸除溶剂,干燥,得样品。
  方法二:
  取黄芩药材20kg粉碎成粗粉,加水润湿,并于20~30℃保温过夜,用乙醇回流提取三次。减压回收乙醇至无乙醇蒸出,残余物加入85%的乙醇,加热使大部分溶解,过滤,滤液用柱层析用硅胶,以柱层析法进行分离,用石油醚与氯仿1∶3洗脱,收取第二条黄色带,即得汉黄芩素约100g,经纯度检查,主要为汉黄芩素(含量大于90%),还含有少量黄芩素、千层纸素和白杨素化合物(含量小于10%)。
  方法三:
  步骤1、同时提取:取黄芩饮片,加12质量倍水加热回流提取2h,提取液过滤,滤渣加10倍量水再提取2次,每次1.5h,合并滤液,获得黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的混合粗提液。
  步骤2、分离:将上步粗提液减压浓缩至每1mL含0.2g生药,以4BV/h的流速上样D101大孔吸附树脂柱,上样量为1BV,先以水洗脱至流出液无色,依次以10BV60%乙醇,6BV80%的乙醇分别洗脱,收集60%的乙醇洗脱液,主要成分为黄芩苷,收集80%的乙醇洗脱液,主要成分为黄芩素和汉黄芩素。将黄芩苷类洗脱液浓缩成每mL含0.5g生药,用2mol/L盐酸调节pH值至2,80℃保温0.5h,静置12h,减压滤过,沉淀水洗至pH值至5.0,再用少量乙醇洗涤,挥尽乙醇,减压干燥,即得黄芩苷,液相色谱面积归一化法测得其纯度为95%,以黄芩中所含黄芩苷计提取率为87%。
  将黄芩素、汉黄芩素的混合洗脱液蒸干,所得黄芩素、汉黄芩素的混合物以少量无水甲醇溶解,上sephadexLH-20凝胶柱,每mL凝胶上样20~50mg混合物,上样体积为凝胶柱体积的3~5%,以无水甲醇洗脱,待凝胶柱上黄色条带下移至柱底端开始分段接流分,每份10mL,视液相色谱结果合并流分,挥干溶剂,即得黄芩素、汉黄芩素纯品,液相色谱面积归一化法测得他们的纯度分别为99%和97%,以黄芩中所含黄芩素计黄芩素提取率为88%,以黄芩中所含汉黄芩素计汉黄芩素的提取率为92%,以上信息由药智网整理。

您需要登录后才可以回帖 登录 | 免费注册

本版积分规则

QQ|(渝)-经营性-2016-0011|渝B2-20120028|药智论坛 ( 渝ICP备10200070号

渝公网安备 50010802001068号

GMT+8, 2021-3-8 05:49

快速回复 返回顶部 返回列表