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[仪器分析] 强大的生物分析技术平台之Bio-plex 200

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本帖最后由 medicilon 于 2018-10-12 15:38 编辑

Bio-Plex200系统是一个功能强大的生物分析技术平台,可以用于蛋白或核酸检测,该系统将先进的软件包、系统检验工具、微球偶联试剂和即用型细胞因子与磷酸化蛋白测试试剂整合在一起,为蛋白和核酸研究人员提供了灵活的复合式测试方案。与传统的采用ELISAELISpot分析方法进行单个细胞特定的细胞因子检测相比,Bio-Plex200系统可以从一份样本中检测多种指标,实现了高通量、快速和定量一次完成来自人类、小鼠、大鼠和其他物种的多种分泌蛋白的检测。

常用的生物分析技术如核酸杂交分析和免疫分析等在临床诊断医学、药物试验和科学研究等各种不同领域发挥着重要作用。Bio-Plex悬液芯片技术自发明以来的主要应用于基因组学、蛋白质组学和临床诊断检测这三个领域。在蛋白质组学领域的应用,悬液芯片技术显示出其巨大的优势,其操作与免疫检测技术(ELISA)几乎相同,已经广泛应用于蛋白质的表达谱,蛋白质翻译后修饰如磷酸化、糖基化,以及对蛋白质功能和相互作用的筛查的研究中,主要领域有各种疾病、生理过程的细胞因子表达谱分析、聚焦蛋白质组学(focused proteomics)研究、转化医学、病理与药理和新药筛选等。美迪西提供细胞因子检测服务。

1、Bio-Plex200系统的多重检测原理

Bio-Plex 200系统基于灵活的xMAP 技术所开发,采用了容易使用的96孔板格式悬液芯片系统,整合了磁珠技术、数据处理的流式细胞技术和多重检测试剂技术,可以实现一滴样品中同步定量检测多达100种不同蛋白质、多肽、DNARNA等生物分子,有助于加速科研创新工作。

Bio-Plex 200系统采用聚乙烯微球、磁珠标记生物分子配体的微球阵列技术,磁珠在体外诊断中扮演者不可替代的作用,通过对磁珠进行一定的包被,可以实现对核酸的高通量和自动化提取。微球编码是多重检测的基础,不同编码的微球偶联有不同的探针分子,如特异性单克隆抗体、核酸等,偶联好的微球混合后可用于多重检测。

10.11Bio-plex微球阵列.jpg

1 Bio-Plex 200系统的微球阵列

该系统采用了红色和红外两种荧光染色包被微球,每种荧光有10种浓度,100种不同比例的荧光来进行微球染色,以完成多重检测。仪器可以实现同一反应孔里不同检测同时混合进行,对每种检测进行微球分类并定量并同时报告所有的检测结果。

Bio-Plex 200系统可以在3小时内完成读板前样品的准备,其对细胞因子的检测流程如下:

1)包被不同抗体的微球与样品、标准品和对照品温浴结合,荧光微球被选择的抗原特异的抗体包被,已包被了抗体的微球混合物与样本进行孵育。样本中的待检物,如细胞因子等与微球上包被的抗体结合;

2)加入特异性生物素标记的检测抗体,生物素标记的抗体混合物,与结合于捕获抗体(微球)的待检物特异性结合;

3)加入streptavidin-PE,与生物素结合进行荧光检测;

4Bio-Plex 200系统读板检测。

10.11Bio-plex检测流程.jpg

2  Bio-Plex 200系统对细胞因子的检测流程

2Bio-Plex200细胞因子检测的优点

1)只需要12.5-50μL的样品,降低了样品的需要量;

2Bio-Plex 200系统的芯片检测器整合了双激光、激流系统和实时数据处理系统,能够同步检测多达100种靶标分子,并可以在4小时内完成实验,减少试剂、成本和劳动力的花费;

3)自动化的数据分析,酶标平台自动读板,短时间内获得上千数据,显著提高单个样本的信息量;

4)在单个样品中获得不同分析物之间相互关系的数据,如同台仪器、操作者和运行获得的数据和消除传统方法所需的反复冻融;

5)多重检测可以做内控实验;

6)能够获得直观的数据结果和标准曲线精确定量。

此外Bio-Plex产品的一个货号包含了实验从开始到结束所需的所有试剂和耗材,解决了用户需要另外订购其他实验所需的耗材的麻烦,省时、省力、省钱。

随着细胞工程和基因工程的发展,大量的天然或重组细胞因子的获得,将会促进Bio-Plex 技术在细胞因子检测上的应用。这种技术的出现对于利用基因工程技术生产用于预防与治疗有活性的细胞因子、利用细胞因子作为疫苗佐剂和研发消除细胞因子对机体造成免疫损伤或抑制排斥反应细胞因子拮抗剂等至关重要。


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