注射剂一致性中元素杂质分析方法验证的关键点

大麦1992

元素杂质的控制是药品整体控制策略的一部分，用以确保药品质量。在 ICH Q3D 中结合元素杂质的来源及影响，将需要检测的 24 种元素分为4类，并且结合不同的给药途径规定了每种元素的 PDE 值，当元素杂质的水平超过控制阈值时，则需要采取额外的手段来确保元素杂质水平不超过 PDE 值。根据 ICH Q3D 的规定，通过科学和基于风险的评估来确定制剂中元素杂质的控制策略，包括原辅包、生产设备等可能引入的元素杂质。

1确定需要验证的元素杂质

根据 ICH Q3D 的规定，不同给药途径安全性评价建议考虑的元素杂质如下：

对于注射剂一致性评价中，无论是否刻意添加，Cd（镉）、Pb（铅）、Hg（汞）、As（砷）、Co（钴）、V（钒）、Ni（镍）、Li（锂）、Sb（锑）、Cu（铜），此10种元素均需进行杂质考察，Tl（铊）、Au（金）、Pd（钯）、Ir（铱）、Os（锇）、Rh（铑）Ru（钌）Se（硒）、Ag（银）、Pt（铂）等元素如在药品生产过程中引入，也应进行相应元素考察。

2样品的前处理

确定了需要分析的元素杂质后，就要确认方法验证中最重要的部分-样品前处理。与<ICH Q3D>指导原则不同,USP<233>对于适用的四种前处理方法做出了明确的规定。需要强调的是，绝大多数的验证数据偏差和后续方法开发的挑战，都来自前样品处理的环节。
虽然每种方法都有自己的特点和适合的样品类型（见下表），总体来说直接溶解法在操作的简易性与安全性，结果的稳定性上都具有一定的优势，也是可以最先尝试的步骤。

比如对于有些易于直接溶解于有机溶剂（比如异丙醇, 二甲亚砜等等）中的医药中间体来说，由于避免了高温高压的反应过程，很多反应性，挥发性强的金属杂质都能获得不错的回收，可以为后期的方法验证以及最终的QC测试节约大量的工作量。
对于不能直接溶解的化合物，还可以选择间接溶解法。其中密闭容器微波消解法是最主流的选择，涉及的方法参数组合也比直接溶解要复杂些。由于是注射剂一致性评价，在此就不重点介绍了。

3方法确认

在摸索出完全溶解样品的方法之后，进一步确认方法可以帮助实验室确认消解溶液的稳定性，仪器参数的设置准确度和精密度的大致范围，为最终的完整方法验证做好准备。
可能遇到的一些问题包括：

4方法学验证

经过方法的初步确认后，方法参数都已经确认，最后的方法验证反而会是最直接的环节（见下表）。

需要强调的是，元素杂质实验的系统适应性要求与传统的液相方法是有区别的，其中：
1.系统适应性可以通过日常的调谐（daily tune）来实现；
2.质量分辨率(mass resolution)可以通过每月一次的质量调谐来实现；
3. 对于痕量金属来说，“重复5-6次进样，RSD保持在NMT 2%”是很难实现的；
4.ICPMS的线性范围非常大，常规定量分析一般做0.5J与2J即可，不用做5个标准点。