论毕赤酵母表达应用前景及方向

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  毕赤酵母表达系统具有易于高密度发酵，能使产物有效分泌并适当糖基化、培养方便经济等特点，已基本成为非常完善的外源基因表达系统。在医药蛋白领域，已有胰岛素、乙肝表面抗原、人血清蛋白（rHSA）、表皮生长因子等多种蛋白使用毕赤酵母表达并实现商品化制备。大量的实例已经证实毕赤酵母表达系统为高效、实用、简便，可提高表达量并保持产物生物学活性为突出特征的外源基因表达系统，非常适宜于扩大为工业规模。
毕赤酵母目前已是仅次于大肠杆菌的最常用蛋白表达系统，广泛应用于实验室规模的蛋白质制备、表征以及结构解析等方面，已有上千种蛋白在毕赤酵母系统中得到成功地表达。山东健通生物科技有限公司科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台，提供优质的重组蛋白在毕赤酵中的表达与纯化服务。
1、使用毕赤酵母表达系统表达胰岛素
糖尿病是一种由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症，其基本病理特征为绝对或相对性胰岛素分泌不足所引起的代谢紊乱。作为最重要的降血糖药，胰岛素对胰岛素缺乏的各型糖尿病均有效，具有巨大的市场需求。因此开发生产胰岛素的新途径、优化现有生产胰岛素的手段一直是医药生物化学领域的一个重要课题。
毕赤酵母是近年发展起来的蛋白表达体系，其醇氧化酶基因启动子是诱导型强启动子，可用来调控外源蛋白的表达。该系统具有操作技术简单，可进行高水平的胞内或胞外表达，及对表达产物进行翻译后修饰与加工等显著优点。利用基因重组技术构建高效表达胰岛素前体的甲醇毕赤酵母工程菌株，可发酵生产人胰岛素。
2、人血清蛋白(rHSA)
人血清白蛋白是一种在医学上应用广泛，需求量大的蛋白质药物。而目前血浆提取生产的方式难以满足市场的要求，用基因工程方法生产人血清白蛋白无疑具有巨大的商业价值。由于巴斯德毕赤酵母表达系统自身的许多优点，使得其在表达外源蛋白中具有十分大的优势。用巴斯德毕赤酵母构建并筛选分泌重组人血清白蛋白(rHSA)基因工程高产菌株，并对其发酵纯化条件进行初步研究。免疫印迹检测所表达的rHSA具有免疫原性。

毕赤酵母表达系统的应用前景
（1）表达具有生物活性的功能蛋白
作为一种正在发展中的表达异源蛋白的宿主菌，毕赤酵母具有真核生物的翻译后加工修饰的特点是能够得到广泛应用的最大魅力所在。
（2）表达医用产品
利用毕赤酵母系统可以生产医用高效蛋白质，如用毕赤酵母生产的重组蛋白有牛胰蛋白酶原、人2A型蛋白磷酸酯酶(PP2A)亚基、乙型肝炎病毒前S1蛋白、戊型肝炎病毒开读框架2片断、人白介素-2、肿瘤坏死因子。另外肿瘤细胞的一个关键的蛋白酶MT1-MMP，在删去C末端跨膜区后，转化酵母并获得表达，这对于癌症的治疗有重要的意义。
（3）毕赤酵母可作为研究一些重要理论和科研的有力工具
毕赤酵母的表达产物可用于结构的研究用毕赤酵母表达系统表达了15N标记的大麦非特异性脂转移蛋白2型(ns-LTP2)，在严格控制生理、生化条件及连接条件的情况下，获得的ns-LTP2蛋白可用于进行精细结构的研究。
随着酵母遗传学及生物学研究的进一步深入，人们越来越多地应用毕赤酵母作为外源基因的表达系统。其在功能蛋白的生产上、商业产品的开发和科学研究上将发挥越来越重要的作用。

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