你一直想知道的移液知识

一世泪倾城

你一直想知道的移液知识


作者：Peter Pfeiffer  
来源：实验与分析


　　正确的移液是实验成功的保障，在实验室工作的每一个人都需要移液操作，但是你知道关于移液器一共有多少种类吗?都是如何应用的呢?今天小析姐就和大家说说移液器类型方面的基础知识，以及它们的应用和各种移液技术。


　　在实验室中，几乎没有一项工作像移液一样普通了。也许正是因为如此普通、简单，所以，没有得到人们的关注吧。但就是这样一个最为普通、简单工作却对检测实验的结果有着至关重要的影响，那么了解移液器类型方面的基础知识，以及它们的应用和各种移液技术是不是就是一个很重要的事情。


　　移液器的基本类型


　　01、活塞式移液器


　　玻璃或者塑料制成的一次性移液器适合于移送液体，它们的采购成本非常低廉，但不能准确的测定移液量，而想精确移液量和移液总量等准确的定量移液时需要使用经典的玻璃移液器。但玻璃移液器在小容量移液时的精度也不高，而且小容量移液时玻璃移液器也显得有些笨重了。移液总量在1mL以上时使用玻璃移液器可以得到理想的移液精度。当移液总量在微升范围内时，只有使用活塞式移液器才能满足精度要求。这种移液器又称之为马尔堡移液器、微型或者微量型移液器。活塞式移液器已经成为实验室中的标准计量器具了，能够在微升范围内快捷方便的完成移液任务。


　　活塞式移液器最大的结构设计特点是带弹簧的可移动柱塞。利用柱塞在移液管中的上下移动，实验员可以任意的设置、调整移液量，因此可以快速、准确的移送限定容积的液体，通常在所谓的量程容积10%至100%的范围内。


　　活塞式移液器分为两大类型：空气正压式移液器和活塞移动式移液器。


　　活塞式移液器的结构设计非常简单类似于注射器，依靠活塞的运动吸取被移送的液体介质，液体介质与活塞端面直接接触。


　　空气正压式移液器在空气正压式移液器中，运动的活塞与被移送的介质之间有一段空气柱，被移送液体介质与移液器吸头相互接触。在移送水性介质、不同液体之间交替移液时，空气正压式移液器是首选的移液器。


　　空气正压式移液器是应用最为广泛的移液器。它还有多通道的变型类型，从而方便的微量滴定板中的移液，例如：8通道移液器和12通道移液器。


　　02、电子移液器


　　当前市场开发出来的最新产品是电子移液器。其简单的操作和多样的可能性使其成为实验室日常工作中的得力助手。它们的最大优点是消除了移液器的压力点误差，因为它不再需要实验员手指的感觉了。尤其是大量移液时它最受欢迎，因为它避免了实验员的手部疲劳。许多电子移液器还提供了作为小容量分液器使用的可能性，即连续多次移送限定容积的液体。


　　与手动活塞式移液器相比较除了这些优点，在购置移液器之前还需考虑其适用范围、最高采购成本和维护保养成本等问题。

　　选择合适的移液器


　　在选择移液器时还要注意被移送液体介质的性质，空气正压式移液器适合于移送水质液体。吸头的选择则要根据被移送液体介质的物理和化学性质，密度很高的液体介质(例如汞)、粘度很高的液体介质(例如蜂蜜)或者蒸发气压很高的液体介质(例如乙醇)应该用活塞式移液器来移送。


　　移液技术和提示


　　原则上有两种移液方式：正向移液和反向移液(参见图3)。两种方式的根本区别在于使用第一和第二按压点的时间不同。在正向移液时移液器吸头完全排空，而反向移液时移液器吸头中保留一部分液体。应用最多的是正向移液，尤其是水质液体。而反向移液最适合于移送高蒸发压力或者高粘度液体介质，在泡沫很多的液体介质移液时，反向移液也有着很好的移液效果。

　　在移液过程中会反复发生相同的典型错误、偏差根源参见表1。表1清楚的说明了这些问题是如何产生的，应该如何避免它们的发生。根据信息，你应该能够避免常见的错误，从而改进实验室的移液技术。

表1 移液时常见的十种错误

	错误根源	怎么出现这样的错误？	应注意什么？
1	移液器选择	最高的移液精度最接近移液器的标称容积。移液量离标称容积越大，移液精度就越差。	尽可能接近标称容积。例如：100微升的移液量应使用100微升的移液器，不要使用1000微升的移液器
2	移液器的状况	污垢、磨损和损失都能导致密封不严，导致错误的移液结果。	小心的使用移液器，定期的清洁和维护保养。偶尔也要清洁移液器的内部，用润滑脂润滑活塞（注意使用手册的规定！）使用前检查有无损伤。
3	移液器吸头的选择	质量不好的移液器吸头会导致密封不严，从而产生很大的移液误差。	使用原装吸头以及生产厂家推荐使用的移液器吸头。检查其他品牌的吸头是否适用。价格低廉的吸头常常不是最佳的选择！
4	移液器吸头的安装	安装不正确的吸头常常导致密封不严。	垂直的安装移液器吸头，注意吸头安装时的力量大小要合适。要做好正确的吸头安装就要多多练习。有疑问时检查密封性。
5	温度	过冷或者过热的液体介质有着其他的密度。移液器吸头和吸取液体之间的温差也会导致吸头内液体容积的变化。	移液器和被移送的液体应尽可能有着相同的温度（室温）。经常悬挂在架子上的移液器应避免因手动摘取移液器而使其加热。
6	预处理	若移液器未经预处理，则在移液的第一步中会有液体介质蒸发到空气柱中去。空气湿度越低，蒸发效果越强。	移液开始前用待移送的液体介质对移液器进行预处理。也就是说：在移液前五次吸入被移送液体并将其排空。每更换一次吸头进行一次预处理。
7	压力点	缺乏经验或者手疲劳时，不能始终准确的掌握压力点。	只有通过不断的练习才能完美的掌握压力点的控制！让您的拇指休息一下。
8	插入深度	吸头深入太深也会导致吸入移液量的增加。吸头外部附着液滴的风险也增大。	吸头仅插入液体表面下几毫米。
9	倾斜的握持移液器	吸液时握持的移液器倾斜着插入液体介质。	吸液时始终保持移液器垂直的插入液体；排液时保持角度稳定（20至45°）
10	忙碌	吸液时过快的释放移液器按钮会导致在液体中出现气泡。严重时液体会被吸入移液器管体内部。过早的释放移液器按钮还可能导致吸入的移液量减少。	有意识的‘延迟’释放移液器按钮，让它慢慢的、均匀的退回。