Good’s缓冲剂——PIPES和HEPES

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Good’s缓冲液是一类专用于生命科学研究的缓冲体系，其不参加和不干扰生物化学过程。下面我们介绍两种常用的Good’s缓冲剂PIPES和HEPES。

PIPES

PIPES的pH缓冲范围是6.1-7.5，不溶于水，溶于NaOH水溶液。PIPES不同于含二（2-羟乙基）氨基基团的缓冲剂（如Bis-tris，Bicine），与多数金属离子不能形成稳定配合物，适用于含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。根据已有的研究结果，PIPES可被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白，用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1和ARF2，作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。另外，由于PIPES能形成自由基，因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法，应当使用低浓度的PIPES缓冲液，这是因为PIPES具有相对较大的离子强度，而且其pKa值具有浓度依赖性。

HEPES

HEPES的pH缓冲范围是6.8-8.2，溶于水，不与金属离子形成稳定的配合物，多数情况下，不会干扰生物化学过程，HEPES常用于各种类型生物体的细胞培养基中；在蛋白质研究中，PIPES常用作阳离子交换色谱法中结合缓冲液的组分和洗脱液；在DNA研究中，PIPES用作磷酸钙和DNA沉淀物形成体系的缓冲液，AFM以及电穿孔实验中的缓冲液。另外，HEPES对DNA和限制酶之间的反应有一定干扰，也不适合用于Lowry氏法测定蛋白质含量。

        综上所述，PIPES和HEPS均属于Good’s缓冲剂，都不能和金属离子形成稳定的配合物，适合于含有金属离子的溶液体系。但它们之间也具有一定的差异性，溶解性方面，PIPES不溶于水，而HEPES具有良好的水溶性；缓冲范围方面，PIPES偏酸性到中性，HEPES偏中性到碱性，这主要是由于两者的结构差异决定的，PIPES有两个磺酸基，HEPES含有一个磺酸基和羟基。另外，PIPES和HEPES在某些体系应用中有一定限制。因此，我们在选择上述缓冲剂的时候，需要综合考虑实验体系的适合性以及两者性质的差异性。