CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤

wangsheng0726

2017年以来，CRISPR技术可谓是来势汹涌！各种关于CRISPR技术研究铺天盖地。

最近，CRISPR技术又登新高峰。据消息，8月14日，来自于耶鲁大学、瑞士巴塞尔大学的研究团队在《Nature Neuroscience》期刊在线发表最新研究成果——利用改造版CRISPR技术寻找到导致脑胶质母细胞瘤的基因突变。

Sidi Chen和巴塞尔大学Randall Platt教授课题组合作开发了一种改良版的CRISPR基因编辑和筛选技术(由腺相关病毒介导)，以患有胶质母细胞瘤的小鼠为模型，寻找致癌的主要驱动基因。他们评估了超1500种基因突变组合，从中发现了多种可能引发癌症的组合，例如B2m-Nf1、Mll3-Nf1和Zc3h13-Rb1组合导致癌变。

　　此外，他们还发现2个基因突变——Zc3h13和PTEN基因，通过影响Rb1基因突变的表达，增强肿瘤对化疗药物的耐药性。

    那如何将CRISPR技术用于研究领域呢？

不妨让我们把目光投向业内已推出CRISPR技术产品的生物公司，如广州往圣生物公司，以OneShine CRISPR/Cas9 基因敲除细胞文库为例：

Lenti-CRISPR V2质粒图谱如上所示。gRNA与Cas9蛋白结合于同一个载体上。将设计合成好的12万个gRNA（靶向约2万个基因），分别连接到Lenti-CRISPR V2载体上，然后把12万个质粒混合起来，形成CRISPR/Cas9 基因敲除质粒文库。将此文库整合到了细胞中，一个125c㎡细胞培养瓶中含有约10^8个细胞，每个细胞被敲除了一个基因，共约2万个基因被敲除，所以含有每个特定基因缺陷的细胞约有5000个（10^8/2万）。最终得到的细胞后，仍可进行传代。

目前该文库可用于人的胃癌、乳腺癌、结肠癌等癌细胞系和永生化的细胞系，可用于研究：

（1）新药靶点确定与验证

（2）环状RNA上游调控机制分析

（3）Long noncoding RNA作用机制验证

（4）脂肪代谢机制研究

（5）干细胞自我更新、不对称性分裂机制等。

CRISPR技术仿佛进入井喷期，CRISPR技术在实际中的应用，如雨后春笋般不断涌现，然而CRISPR技术在某些研究中确实提供了方向，但是，如何达到预期效果还需我们不断地去探索！