化学药物质量分析方法验证技术指导原则解读

雨中飘摇叶

　　

        ①已有重现性验证，不需验证中间精密度
　　
　　②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。
　　
　　③视具体情况予以验证。
　　
　　④本表摘自《中国药典》2010版二部XIXA药品质量标准分析方法验证指导原则
　　
　　分析方法验证原则
　　
　　1、验证内容基于检测项目在控制药品质量方面所起的作用
　　
　　即使相同的检测方法处在不同的检测项目中，其验证内容也会不同。
　　
　　如：HPLC作为鉴别项，专属项是重点；而作为含量测定时则应增加线性、范围、准确度等
　　
　　2、不管新药还是仿制药对建立的分析方法均应进行验证
　　
　　仿制药“仿品种不是仿标准”，已有的被仿制药质量标准中质控分析方法只能作为仿制药品质量标准制订的参考，在建立仿制药质量标准时仍需重新对建立的质控项目分析方法进行验证，并根据自身品种的特点建立相应的质量标准。
　　
　　3、每个检测项目所采用的分析方法均需进行方法验证,以证明所采用的分析方法科学合理
　　
　　质量控制分析方法验证的要求和常见问题分析
　　
　　【鉴别】专属性是重要内容，通常采用2种或2种以上分析方法，且是不同原理的分析方法，如一种采用化学法，而另一种采用色谱法。
　　
　　常用方法：化学法、色谱法（如TLC、HPLC）、光谱法（紫外-可见分光光度法、原料药用红外分光光度法）等
　　
　　存在问题：1）鉴别方法设置不全面，未能有效鉴别药物。
　　
　　如忽视酸根的鉴别。乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液,采用专属性较高的HPLC法鉴别左氧氟沙星,而未建立氯化物、乳酸盐的鉴别方法。
　　
　　2）忽视仿制药鉴别项分析方法的专属性验证，如不考察由于辅料不同可能对主药鉴别带来的负面影响，不提供空白辅料的干扰试验资料，无法判断鉴别方法的专属性。
　　
　　【杂质检查】专属性和检测灵敏度主要验证内容，通常采用HPLC法
　　
　　1）原料药有关物质检查分析方法验证对于可获得的杂质,如合成中的起始原料、各中间体、聚合物、副产物，均应进行主药与杂质的分离度试验，并且不仅检测主药的最低检测限，也要考察各杂质的最低检测限，以证明在现有的条件下能有效检查杂质。部分杂质或降解产物不能直接获得时，需进行破坏性试验，考察主药与降解产物之间的分离度和检测灵敏度，验证所拟定的方法能否有效检出药物在生产、放置、贮存、使用过程中可能产生的杂质。
　　
　　2）制剂有关物检查方法验证除了应考虑原料药关注的内容，还应关注辅料及辅料降解产生的降解产物对检测方法可能带来的干扰，因此在进行破坏性试验时,辅料应在相同条件下进行实验，考察辅料的降解。提供空白辅料的实验结果，证明辅料对实验结果无干扰。当辅料对实验结果存在干扰时,应尽量完善方法,以消除辅料的干扰。
　　
　　存在问题：1）未能对原料药合成工艺中涉及到的起始原料、中间体、聚合物、副产物等全面地进行与主药的分离度试验,往往仅是做了一部分可获得的杂质与主药之间的分离度实验。
　　
　　2）忽视提供起始原料、中间体、聚合物、副产物等可获得杂质的最低检测限,无法判断在现有的检测条件和方法下能否检出主药中的杂质。
　　
　　3）破坏性试验不规范，体现在试验条件的确定,降解产物的检测、分离度的确定等方面。
　　
　　4）用原料药的破坏性试验结果作为制剂的破坏性试验资料,忽视了辅料在剧烈条件下降解可能带来的干扰和影响。
　　
　　5）未提供空白辅料的实验图谱和结果,无法判断辅料是否干扰。当辅料对实验结果存在干扰时，未能采取有效方法排除其干扰。
　　
　　6）色谱图中主峰出现明显的其他杂质峰，未优化实验条件。
　　
　　【定量测定】验证内容多，重点关注范围实验。

　　

　　药物含量测定分析方法，在质量研究阶段，通常建立2种测定原理不同的测定方法，比较测定方法的优劣，结合质量标准中其他项目的质控方法，确定最终质量标准中收载的分析方法。
　　
　　存在的问题1）验证的内容不全面,忽视部分验证内容,如耐用性、样品溶液稳定性等分析方法验证资料。
　　
　　2）准确度的实验内容不规范,未按要求在规定的范围内,设计3个不同浓度,每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定。未能按四位有效数字提供准确度测定结果，测定结果计算不规范。
　　
　　3）样品的测定浓度不在验证的范围之内。
　　
　　4）样品溶出量或释放量的测定，通常采用含量测定方法，但有时也不完全一致。当不一致时，未重新提供溶出量或释放量测定方法的验证资料。
　　
　　其他特定检测项目如粒径分布、旋光度、分子量分布等，应根据项目的具体要求进行相应的验证，保证检测方法可行。
　　
　　此外，质量研究中还应提供微生物限度、无菌的方法学验证资料。