CRISPR/Cas9细胞文库：一次实验确定2万个基因对研究模型的...

wangsheng0726

基于OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库的运用和服务 1. OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库：一次实验即可确定2万个基因对研究模型的影响，例如一次实验可确定2万个基因对干细胞自我更新的影响。 2.什么是OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库？ OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库是保存于一个10cm平皿上的、含有约108个细胞的混合物。此细胞混合物中，每个细胞被敲除了一个基因，共约2万个基因被敲除了，所以含有每个特定基因缺陷的细胞约有5000个（108/2万）。 3. OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库的运用 （1）新药靶点确定与验证 （2）环状RNA上游调控机制分析、下游调控机理分析 （3）Long noncoding RNA作用机制验证 （4）脂肪代谢机制研究 （5）干细胞自我更新、不对称性分裂机制 …… from 广州往圣生物科技有限公司 & 广州往圣智能科技有限公司 020-22213156 4.基于OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库的服务 （1）新药靶点确定与验证 （2）基金项目实施 （3）论文设计、实验与发表 往圣科技”筹备于2016年,下设”往圣智能”与”往圣生物”两个子公司。公司以“让病人能在家看病”为目标，致力于通过“人工智能+机器人+新药创制”为人类健康保驾。 “往圣智能”专注于“机器人医生”的研制开发，将为机器人配备“医生大脑+医学检查系统”，完全实现医生为病人看病的全过程，让患者足不出户就可享受名医水准的医疗服务。 “往圣生物”专注于新药创制。公司以CRISP/Cas9基因敲除系统为基础，开发自主知识产权的疾病发病机理研究体系，寻找新型疾病治疗药物。目前公司以“肝癌”为切入点，开发肝癌治疗药物，为肝癌患者提供新的希望。 5.为什么OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库一次可确定2万个基因对研究模型的影响？ （1）起始基因敲除的CRISPR/Cas9文库是约20ul体积的质粒混合物，包含约2万种质粒，每种质粒可敲除一个基因。 （2）细胞培养时，每一个10cm平皿约含有108个细胞。 （3）取三个长满细胞的10cm平皿A、平皿B、平皿C，其中一个平皿A和平皿B分别用包含约2万种质粒的CRISPR/Cas9文库转染108个细胞，理想状态下，其中的每个质粒进入一个细胞、并敲除此细胞的一个基因，所以含有每个特定基因缺陷的细胞约有5000个（108/2万）。平皿C转染对照质粒，对照质粒中不包含基因敲除元件，不会影响基因。 （4）向平皿A和平皿C中加入处理，比如向实验组和对照组平皿中加入相同量的化疗药物；平皿B不作处理。 （5）对平皿A、平皿B、平皿C中的存活细胞进行基因组测序。此时，假设： 文库可敲除的基因为：ABCDEFGHIJK。 平皿A活细胞中被敲除的基因为：ABCDIJK。 平皿B活细胞中被敲除的基因为：ABCDGHI。 平皿C活细胞中被敲除的基因为：无（对照组未进行基因敲除操作）。 从平皿B的结果看，文库本可敲除基因为ABCDEFGHIJK，目前只检测到ABCDGHI。换句话说，EFJK基因的敲除可直接导致细胞死亡，而不需要化疗药物的参与。从平皿A的结果看，文库本可敲除基因为ABCDEFGHIJK，目前只检测到ABCDIJK。换句话说，EFGH基因的敲除可直接导致化疗药物处理过的细胞死亡。总之，EF基因敲除直接导致细胞死亡，不需要化疗药物参与。JK敲除本可直接导致细胞死亡，而加入化疗药后没有死亡，说明JK敲除可使细胞产生对化疗药物的耐药性。GH基因敲除本不会导致细胞死亡，而加入化疗药物后，细胞死亡了，说明GH基因敲除可增加细胞对化疗药物的敏感性。 from QQ：3452125268 OneShine™CRISPR/Cas9细胞文库已经完成了繁琐的文库构建、文库导入、细胞筛选过程，收到文库后，可直接用细胞进行测试，一次实验即可确定2万个基因对研究模型的影响。

雨中飘摇叶

CRISPR/Cas9细胞文库真的这么好用吗

wangsheng0726

往圣科技”筹备于2016年,下设”往圣智能”与”往圣生物”两个子公司。公司以“让病人能在家看病”为目标，致力于通过“人工智能+机器人+新药创制”为人类健康保驾。

wangsheng0726

雨中飘摇叶 发表于 2017-1-11 10:03
CRISPR/Cas9细胞文库真的这么好用吗

OneShine™CRISPR/CAS9细胞文库确实很好用，操作简单，基本都能出阳性结果